香蕉枯萎病菌4號(hào)小種β-1,6-半乳聚糖酶的純化與鑒定
關(guān)鍵詞：4號(hào)小種 質(zhì)譜 鑒定
摘要：收集了1%柑桔果膠作為碳源誘導(dǎo)培養(yǎng)的香蕉枯萎病菌(Fusarium oxysporum f. sp. Cubense)4號(hào)小種菌液,通過PM-10膜超濾、Sephacry S-100凝膠過濾柱層析和超濾除雜蛋白等步驟進(jìn)行分離, SDS-PAGE電泳獲得單一約50 kDa的蛋白條帶.經(jīng)過質(zhì)譜鑒定,獲得其肽質(zhì)量指紋譜,最后與數(shù)據(jù)庫比較,與尖孢鐮刀菌番茄專化型的β-1, 6-半乳聚糖酶(gi:119507928)匹配度最高.克隆獲得該蛋白的DNA序列 Foc4gal1 共1 368 bp,包含2個(gè)內(nèi)含子和3個(gè)外顯子;開放閱讀框?yàn)? 263 bp,預(yù)測編碼420個(gè)氨基酸殘基,1-20個(gè)氨基酸殘基為其信號(hào)肽序列,理論等電點(diǎn)為5.26,分子量約47.2 kDa.本研究成功純化鑒定了香蕉枯萎病菌4號(hào)小種β- 1,6 -半乳聚糖酶,并克隆了該蛋白的基因序列.
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