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miR-21調(diào)控非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞增殖和凋亡的機(jī)制研究
關(guān)鍵詞：癌 非小細(xì)胞肺 程序性細(xì)胞死亡因子4 細(xì)胞增殖 細(xì)胞凋亡
摘要：目的研究非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）中高表達(dá)的miR-21對(duì)細(xì)胞增殖和凋亡的影響及其調(diào)控機(jī)制。方法采用熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)miR-21在人NSCLC組織、癌旁組織和A549細(xì)胞系中的表達(dá)。通過(guò)序列分析預(yù)測(cè)被miR-21調(diào)控的抑癌基因，通過(guò)熒光素酶活性檢測(cè)和Western blot檢測(cè)驗(yàn)證miR-21對(duì)靶基因表達(dá)調(diào)控的影響。采用RNA干擾技術(shù)抑制miR-21和程序性細(xì)胞死亡因子4（PDCD4），以臺(tái)盼藍(lán)染色和流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)A549細(xì)胞增殖和凋亡的變化。結(jié)果NSCLC組織和A549細(xì)胞中miR-21的表達(dá)水平分別為癌旁組織的2．24倍和3．06倍。序列預(yù)測(cè)和基因表達(dá)調(diào)控研究表明，miR-21可以在NSCLC中反向調(diào)控PDCD4的表達(dá)（P〈0．01）。熒光素酶活性檢測(cè)結(jié)果顯示，共同轉(zhuǎn)入Wt3’UTR和miR-21會(huì)顯著抑制A549細(xì)胞中的熒光素酶表達(dá)（P〈0．001）。Western blot檢測(cè)結(jié)果顯示，導(dǎo)人反義寡核苷酸抑制miR-21的功能后，PDCD4的表達(dá)水平明顯上升。抑制miR-21的作用可以顯著抑制A549細(xì)胞的增殖，并使細(xì)胞凋亡率由2．6％上升到10．9％，而抑制PDCD4的表達(dá)可以在很大程度上消除miR-21介導(dǎo)的細(xì)胞增殖障礙，抑制細(xì)胞凋亡。結(jié)論在NSCLC中，抑制抑癌基因PDCD4的表達(dá)可能是miR-21介導(dǎo)腫瘤細(xì)胞增殖、抵抗凋亡的重要途徑之一。
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