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細胞培養氨基酸穩定同位素標記-質譜技術測定槲皮素對人肝癌細胞熱休克蛋白表達的影響

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關鍵詞:槲皮素 hepg2細胞 熱休克蛋白 

摘要:目的觀察槲皮素對人肝癌細胞HepG2中熱休克蛋白(HSP)發達的影響,為其抗腫瘤活性探尋可能的靶點。方法經過連續傳代,充分氚化HepG2細胞中的亮氨酸,并鑒定其標記率。采用四早基偶氮唑藍(MTT)法檢測槲皮素對HepG2細胞中的亮氨酸,并鑒定其標記率。采用四早基偶氮唑藍(MTT)法檢測槲素對HepG2細胞生長的抑制活性及有效濃度。以50μmol/L槲皮素作用氚化HepG2細胞45h后,與正常HepG2細胞按1:1等量混合電泳,提肽后時行質譜鑒定,將獲得的肽片段數據進行Mascot檢索。結論SILAC-MS成熟可靠,能全面定量分析外因作用前后HepG2細胞中全系列蛋白譜的變化,槲皮素對HepG2細胞中HSP表現出強烈的抑制能力,并且這種作用可能是其發揮腫瘤活性的途徑之一。

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