p38絲裂原活化蛋白激酶對人乳牙牙髓干細胞成骨分化能力的影響
關鍵詞：乳牙牙髓干細胞 牙髓干細胞 p38絲裂原活化蛋白激酶 成骨分化
摘要：目的:比較人乳牙牙髓干細胞(SHED)及牙髓干細胞(DPSC)增殖及成骨分化能力差異,探討p38絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)在人乳牙牙髓干細胞及牙髓干細胞中的表達及對干細胞成骨分化能力的影響。方法:有限稀釋法分離培養SHED和DPSC,ELISA法檢測IL-1β、TNF-α分泌水平;PCR檢測PCNA及CCND-1表達;兩種干細胞常規培養及成骨誘導7d后進行ALP染色、實時定量PCR檢測Runx2、OCN基因表達。采用Western blot檢測兩種細胞成骨誘導7d后p38及磷酸化p38(p-p38)的表達。使用p38 MAPK特異性抑制劑SB203580干擾后Western blot驗證抑制效果;在SB203580干擾后流式細胞儀檢測兩種細胞周期變化,Western blot檢測細胞OCN、ALP表達。結果:SH ED的PCNA、CCND-1、Runx 2、OCN表達水平高于DPSC。SH ED的p38表達量高于DPSC;成骨誘導后兩種PDLSCs中的p-p38表達均升高,但p38表達水平有所降低。SB203580干擾后SHED的增殖指數及OCN和ALP表達水平顯著降低。結論:SHED的增殖能力及成骨分化能力高于DPSC,p38 MAPK在調控SH ED的生物學功能中發揮重要作用,抑制p38后SH ED的增殖及成骨分化能力也被顯著抑制。
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