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基于不同重組小反芻獸疫病毒N蛋白建立的雙抗原S-ELISA抗體檢測方法的比較研究

孫雨; 宋曉暉; 肖穎; 李秀梅; 呂園園; 王睿男; 蔣菲; 孫航; 楊林; 王傳彬 中國動物疫病預防控制中心; 北京102600; 重慶動物疫病預防控制中心; 重慶400000; 洛陽現代生物技術研究院有限公司; 河南洛陽471000

關鍵詞:原核表達載體 小反芻獸疫 核衣殼n蛋白 雙抗原夾心elisa 比較 

摘要:為探索建立小反芻獸疫病毒抗體雙抗原夾心ELISA方法的原料,本研究成功使用pET-30a與p ET-32a兩個不同原核載體分別表達與純化了小反芻獸疫病毒核衣殼蛋白N抗原。使用不同原核載體表達的N抗原組合建立的雙抗原夾心ELISA抗體檢測方法、相同原核載體表達的N抗原組合建立的雙抗原夾心ELISA抗體檢測方法、N抗原包被建立的抗體間接ELISA檢測方法以及血清中和試驗方法分別對已知背景的小反芻獸疫抗體陽性血清與小反芻獸疫抗體陰性血清進行檢測。綜合考慮方法的敏感性、特異性和穩定性,最終選擇用不同原核載體表達的pET-30a-(N)與pET-32a-(N)抗原組合建立的小反芻獸疫病毒抗體雙抗原夾心ELISA檢測方法。

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