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基于不同重組小反芻獸疫病毒N蛋白建立的雙抗原S-ELISA抗體檢測(cè)方法的比較研究

孫雨; 宋曉暉; 肖穎; 李秀梅; 呂園園; 王睿男; 蔣菲; 孫航; 楊林; 王傳彬 中國動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心; 北京102600; 重慶動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心; 重慶400000; 洛陽現(xiàn)代生物技術(shù)研究院有限公司; 河南洛陽471000

關(guān)鍵詞:原核表達(dá)載體 小反芻獸疫 核衣殼n蛋白 雙抗原夾心elisa 比較 

摘要:為探索建立小反芻獸疫病毒抗體雙抗原夾心ELISA方法的原料,本研究成功使用pET-30a與p ET-32a兩個(gè)不同原核載體分別表達(dá)與純化了小反芻獸疫病毒核衣殼蛋白N抗原。使用不同原核載體表達(dá)的N抗原組合建立的雙抗原夾心ELISA抗體檢測(cè)方法、相同原核載體表達(dá)的N抗原組合建立的雙抗原夾心ELISA抗體檢測(cè)方法、N抗原包被建立的抗體間接ELISA檢測(cè)方法以及血清中和試驗(yàn)方法分別對(duì)已知背景的小反芻獸疫抗體陽性血清與小反芻獸疫抗體陰性血清進(jìn)行檢測(cè)。綜合考慮方法的敏感性、特異性和穩(wěn)定性,最終選擇用不同原核載體表達(dá)的pET-30a-(N)與pET-32a-(N)抗原組合建立的小反芻獸疫病毒抗體雙抗原夾心ELISA檢測(cè)方法。

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