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多硫代二酮哌嗪類化合物1004體外對(duì)MDA-MB-231細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力的影響及機(jī)制研究
關(guān)鍵詞：轉(zhuǎn)移 信號(hào)通路 akt erk
摘要：目的檢測多硫代二酮哌嗪類化合物1004體外對(duì)三陰性乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力的影響,并初步研究其作用機(jī)制。方法利用磺酰羅丹明染色法(SRB)檢測1004作用于MDA-MB-231細(xì)胞24和72h的細(xì)胞毒活性;細(xì)胞黏附實(shí)驗(yàn)檢測1004對(duì)MDA-MB-231細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)黏附的影響;劃痕實(shí)驗(yàn)和Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)分別檢測1004對(duì)MDA-MB-231細(xì)胞遷移和侵襲的影響;明膠酶譜法檢測1004對(duì)MDA-MB-231細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶MMP9活性的影響;Western Blot檢測1004對(duì)MDA-MB-231細(xì)胞N-cadherin、Snail、c-Myc和FGFR1的蛋白表達(dá)的影響,檢測蛋白激酶B(PKB,亦稱AKT)和細(xì)胞外蛋白調(diào)節(jié)激酶(ERK)的表達(dá)和活化水平。結(jié)果 1004作用于MDA-MB-231細(xì)胞72h的IC50為(6.28±1.25)μmol·L^-1,而1004作用于MDA-MB-231細(xì)胞24h的IC50超過100μmol·L^-1。1004作用于MDA-MB-231細(xì)胞可增加細(xì)胞黏附,并抑制細(xì)胞的遷移和侵襲。1004可以顯著降低N-cadherin、c-Myc及Snail的表達(dá)水平,并抑制MMP9的活性。1004作用于MDA-MB-231細(xì)胞可以濃度依賴性地引起FGFR1的表達(dá)下調(diào),并抑制下游ERK和AKT的活化。結(jié)論1004體外對(duì)MDA-MB-231細(xì)胞具有轉(zhuǎn)移抑制活性,其機(jī)制可能與下調(diào)FGFR1的蛋白水平并抑制FGFR信號(hào)通路有關(guān)。
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