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敲減CDKL5對人膠質母細胞瘤細胞生長和細胞周期的影響

張驚宇; 丁婧; 鄭永慧; 初婷婷; 趙琳琳; 楊濱瑞; 高騰 黑龍江省醫學科學院; 黑龍江哈爾濱150081; 哈爾濱醫科大學附屬第四醫院神經內科; 黑龍江哈爾濱150001

關鍵詞:cdkl5 人膠質母細胞瘤細胞 shrna 細胞生長 細胞周期 

摘要:目的探討敲減周期蛋白依賴型激酶樣5(cyclin-dependent kinase-like 5,CDKL5)對人膠質母細胞瘤細胞生長和細胞周期的影響,為膠質母細胞瘤的治療提供新思路。方法本研究使用人膠質母細胞瘤細胞U87,使用慢病毒感染的方法敲減CDKL5基因。利用Western blot顯示CDKL5的細胞定位以及特異性的小發卡RNA敲減效率。使用血細胞計數法繪制4 d U87的細胞生長曲線,同時利用MTT檢測細胞活性。使用流式細胞儀技術檢測細胞周期。結果在U87人膠質母細胞瘤細胞中,CDKL5在細胞核和細胞質當中都有表達,我們發現使用shRNA敲減CDKL5后,胞質中的CDKL5顯著減少,細胞形態也發生明顯改變。敲減CDKL5同時抑制人膠質母細胞瘤細胞的體外增,引起細胞周期停滯。結論敲減CDKL5可以顯著抑制人膠質母細胞瘤細胞增殖,引起細胞周期停滯,為人膠質母細胞瘤的治療提供了一個新的理論方法。

中風與神經疾病雜志要求:

1.全文字數 論著字數不限,提倡言簡意賅;講座和綜述5?000~7?000字;臨床經驗1?500~3?500字;病例報告不超過2?500字。

2.字體 正文用5號宋體,行距1.5倍。

3.文題 各欄目稿件均須附中、英文文題。中文文題不宜超過25個漢字。

4.作者 論著欄目文章實行通信作者(correspondingauthor)負責制。通信作者一般是課題負責人或研究生導師,應熟悉論文的全部內容,對文章負全部責任。其他欄目的文章不設通信作者。通信作者的姓名、性別及職稱以腳注的形式列于論文首頁的下方。作者姓名放在文題下方,作者名之間用空格分開。在作者姓名下方列出單位全稱、科室、所在省市和郵政編碼。有多個作者來自不同單位時,在作者姓名的右上方加注阿拉伯數字。集體署名必須在文章后列出執筆者和通信作者。英文摘要中的中國人名用拼音形式,如李小明,寫為LIXiao-Ming。及時作者以腳注的方式列出姓名、性別、學位和職稱。為了支持多中心協作研究項目,各協作單位的及時作者可并列為該文的及時作者。

5.摘要 論著和綜述/講座須有350字以內的中、英文摘要,采用第三人稱撰寫。其中論著類文章的中英文摘要采用結構式,內容包括“目的”“方法”“結果”和“結論”;綜述/講座類文章摘要采用敘述式。英文摘要還應加文題、全部作者姓名、及時作者科室、單位、所在城市、郵政編碼和國名及通信作者(或及時作者)的Email地址。

6.關鍵詞 在中、英文摘要之后,均須列出2~5個中、英文關鍵詞,各詞之間用“;”分隔。關鍵詞盡量使用美國國立圖書館編輯的新版IndexMedicus中的醫學主題詞(MeSH)內所列出的詞。關鍵詞必須包含研究對象。

7.正文 “前言”要反映出本研究的先進性和可行性,在闡明研究背景和理論、列出重要參考文獻的基礎上提出假說和研究目的。“材料與方法”應介紹實驗對象的選擇及各(亞)組的例數、儀器與試劑(注明產地和廠家)、研究或實驗方法及步驟。實驗步驟應提供足夠的細節以便他人重復。“結果”按邏輯順序描述,不要重復圖表中的數據。“討論”必須緊扣研究目的,圍繞結果進行分析,以揭示事物的本質,作出恰如其分的結論。

8.表格 表格按照正文中出現的次序連續編號,隨文編排。每張表格必須有表題。表格采用三橫線表,如有統計學處理數據需要列出時,可在底線上加一細橫線,表注用上標“a,b,c…”表示。表中要有各(亞)組的例數;英文縮寫均要在表注中寫出全稱。

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