云南松胚性愈傷組織誘導(dǎo)研究
關(guān)鍵詞：云南松 未成熟胚 胚性愈傷組織 誘導(dǎo)率
摘要：以未成熟云南松種子為研究材料,選擇合適的消毒方法,進(jìn)行合子胚發(fā)育狀態(tài)觀測(cè),從外植體類型、采果母樹基因型、培養(yǎng)基種類3方面探討其對(duì)胚性愈傷組織誘導(dǎo)的影響,并鑒定了胚性愈傷組織。結(jié)果表明:75%乙醇消毒30 s,無菌水沖洗2次,2%氯酸鈉浸泡15 min,無菌水沖洗4~5次為種子最佳消毒方案;不同外植體類型對(duì)出愈率影響不顯著,但對(duì)胚性愈傷組織的形成具有極顯著影響,取帶胚乳的合子胚作為外植體的胚性愈傷組織誘導(dǎo)率可達(dá)34.3%,而合子胚作為外植體時(shí)誘導(dǎo)率為14.3%;采用14種培養(yǎng)基接種,平均誘導(dǎo)率在2.2%~17.6%之間,其中接種于MLV+2, 4-D 2.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+KT 1.0 mg/L+肌醇0.1 g/L,1/2LM+2, 4-D 2.2 mg/L+6-BA 1.1 mg/L+AgNO3 3.4 mg/L+肌醇0.1 g/L,DCR+6-BA 0.63 mg/L+KT 0.61 mg/L+NAA 2.0 mg/L+肌醇0.2 g/L+麥芽糖15 g/L培養(yǎng)基的胚性愈傷誘導(dǎo)率分別為17.6%、17.6%、16.5%,表明該3種培養(yǎng)基適合于云南松的胚性愈傷誘導(dǎo);8株云南松優(yōu)株未成熟帶胚乳合子胚的胚性愈傷組織平均誘導(dǎo)率為5.1%~19.4%,最高的是076號(hào)云南松,最低的是075號(hào)云南松,表明基因型對(duì)胚性愈傷組織誘導(dǎo)具有極顯著的影響。
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