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乙醇誘導肝星狀細胞凋亡模型的建立

張春燕; 陳川寧; 陶忠樺; 甘淋 西南醫科大學基礎醫學院生物化學與分子生物學教研室; 四川瀘州646000; 西南醫科大學公共衛生實驗教學中心; 四川瀘州646000

關鍵詞:乙醇 酒精性肝病 肝星狀細胞 凋亡 凋亡相關基因 

摘要:目的:探討乙醇誘導肝星狀細胞(hepatic stellate cell,HSC)凋亡模型的作用及其與凋亡相關基因caspase-3、p53、bax和bcl-2表達的關系。方法:用CCK-8法檢測不同濃度(0、10、20、40、60 和80 mL / L)的乙醇對HSC的殺傷作用。采用40 mL / L乙醇作用6 h誘導HSC細胞凋亡。通過流式細胞術分析乙醇誘導對凋亡的影響,并用實時定量PCR檢測乙醇誘導對凋亡相關基因caspase-3、p53、bax和bcl-2表達的影響。結果:隨著乙醇濃度的增加,對HSC的殺傷能力逐漸增加。40 mL/ L乙醇使HSC發生顯著的細胞凋亡變化。流式細胞術檢測發現乙醇誘導可使HSC早期+晚期凋亡明顯增加(8.76% ± 0.43% vs 11.51% ± 0.54%),差異具有統計學意義(t = 2.11,P 〈 0.05);促凋亡基因caspas-3、bax和p53的mRNA表達水平上調,抑制凋亡基因bcl-2的mRNA 表達水平下調。結論:低濃度乙醇可誘導HSC凋亡增加,其凋亡發生與凋亡相關基因caspase-3、p53、bax和bcl-2表達改變相關。

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