牦牛Eppin基因CDS的克隆及其在附睪不同區段中的表達研究
關鍵詞：牦牛 eppin基因 生物信息學 附睪 組織表達
摘要：為了研究牦牛附睪組織中精子成熟的相關機理,并為探討高原動物的生殖機制提供基本數據。本研究運用基因克隆技術對牦牛附睪Eppin基因CDS全長序列進行克隆,采用生物信息學方法進行分析,Eppin基因和編碼序列特征進行了預測和分析。結果表明,牦牛Eppin基因的CDS含有一個405 bp長度的片段,由134個氨基酸編碼;牦牛Eppin基因對應的蛋白分子量和理論等電點分別為15.09 ku和8.67 ku,其對應的氨基酸沒有跨膜結構,歸于近水性蛋白;25個α-螺旋、27個延伸鏈、2個β-折疊及80個無規則卷曲構成其蛋白質二級結構;牦牛Eppin基因編碼氨基酸序列與黃牛、藏羚羊、綿羊等物種間同源性較高,系統進化情況與其親緣關系遠近一致。本研究應用實時熒光定量PCR技術分析Eppin基因在附睪組織3個不同區段(頭部,頸部和尾部)中的表達情況,熒光定量PCR結果顯示,Eppin基因在牦牛附睪組織3個不同區段中均有不同程度的表達,在附睪頭部中表達最高,頸部和尾部表達較低。本研究將為牦牛附睪精子成熟的機制和Eppin基因在牦牛附睪上皮細胞中的功能提供一定的基礎數據。
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