時間:2022-10-27 17:13:38
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中圖分類號:G623.5 文獻標志碼:A 文章編號:1674-9324(2013)23-0089-02
《數學課程標準》指出:教師是學生學習的組織者、合作者和引導者。數學知識是人類文明的重要組成部分,是人類千百年來智慧的結晶。人類浩瀚的知識之河,決定人類的學習離不開接受,決定學生學習離不開教師引導。有效發揮教師在課堂教學中的引導作用,能喚起學生的積極思維,激發他們的求知欲望,能誘發他們全身心地投入學習。因此,教師要根據不同的教學內容,選擇恰當的教學手段和方法,做到既激發學生的學習興趣,又促使自主參與學習得到提高,從而達到提高課堂教學質量,進而使教學活動更精彩。
一、培養遷移能力,“導”在以舊引新
巴甫洛夫指出:“任何一個新的問題的解決都是利用主體經驗中已有的舊工具實現的。”數學知識前后聯系緊密,邏輯性強,新的數學知識往往是舊知識的延伸或發展。教學時,必須注意新舊知識的聯系,引導學生從已有的舊知識出發,瞄準知識的“生長點”“膨化處”,為引進新知搭橋鋪路,形成正遷移。因此,教學中重視新知識的鋪墊工作,注重孕伏,這既是構建良好認知結構的必要前提,也是提高學生學習的自信心和遷移能力的重要方法。學生一旦能夠運用已有認知結構通過遷移去獲取新的知識,就能掌握了“舉一反三”“觸類旁通”的本領。這樣將會極大地激勵學生學習的積極性。例如:在教學“乘法交換律”這一概念時,通過復習加法交換律,再列出幾組每一個因數與另一個因數互換位置的式題讓學生計算并找出規律,這時學生就自然而然地獲取“乘法交換律”這一規律。這樣通過類比遷移出新概念。
二、濃厚學習氛圍,“導”在設疑激趣
興趣是最好的老師,是入門的向導,是學生探索知識的直接動力。心理學家魯賓斯坦說過:“思維通常開始于疑問或問題,開始于矛盾。”課堂教學中教師要巧設疑難,讓學生在爭論、辨析中激活思維,激發興趣,培養學生質疑、解疑的能力。如:在教學三角形的內角和時,我首先組織了一次別開生面的師生“競猜”活動:要求每個學生在練習本上用直尺畫一個三角形。量得每一個角的度數,寫在圖上。然后,依次由學生報出自己所畫的三角形的兩個內角的度數,看誰能很快猜出第三個角的度數。結果每次老師都脫口而出。這時學生心想,老師既沒有量,甚至連我畫的三角形都沒有看見,怎么就知道第三個角的度數呢?這里邊一定有什么奧妙呢?好奇心促使他們迫不及待地要知道老師的“妙法”,這時,老師順勢引導,讓學生討論、交流,嘗試解決問題。
三、培養自主能力,“導”在學法提示
《數學課程標準》強調:“要重視引導學生自主探索,培養學生自主學習能力。”學生是學習的主人,在教學中應千方百計地引導他們主動地參與到各種學習活動中去。讓學生自己去看書、去思考、去發現問題、分析問題、解決問題。從而掌握自學方法,探索知識的規律。因此,教學中要有目的、有意識、有計劃地指導學生在學習過程中領悟相應的學習方法,使他們逐步由“學會”到“會學”,不斷提高自主學習能力。在課堂教學中,常用“導學提綱”引路,提示自學方法和重點。讓學生學會根據“導學提綱”提示的問題、要求、方法、步驟去自學:做到一看(看課本,包括插圖),二理(理思路),三找(找難點),四抓(抓重點),五想(想疑點)。例如:教學“倍數問題”,這樣擬定以下“導學提綱”:(1)看例題,想誰是1倍數?(2)用已學過的方法解答。(3)看解題的過程,想解決問題的步驟關鍵是什么?(4)你還能根據什么的數量關系列出別的算式?學生通過看,弄清了思路;通過想,找出了解題的關鍵是利用1倍數、倍數、幾倍數之間的數量關系列式;通過做,掌握解決這類問題的“思維模式”和方法。使學生的思維能力得到了發展。用“導學提綱”引路,指導學生自學方法是一個慢長的過程,要經歷從教師擬定“導學提綱”、師生共同擬定“導學提綱”,到最后由學生自己獨立自學課本這三個階段。同時在擬導學提綱時必須注意:(1)符合學生的認識水平。(2)符合新教材的知識結構。(3)符合數學學科特點。從而培養了學生的自主學習能力。
自從參加工作以來,我首先在師德上嚴格要求自己,要做一個合格的人民教師!認真學習和領會黨的十六大精神和“三個代表”重要思想,與時俱進,愛崗敬業,為人師表,熱愛學生,尊重學生,爭取讓每個學生都能享受到最好的教育,都能有不同程度的發展。
基于以上認識,我在工作上兢兢業業,不敢有絲毫馬虎,備好每一節課,上好每一堂課,批好每一份作業,教育好每一個學生,努力去做一個深受學生尊重和信賴的老師。
一、做一個科研型教師
教師的從教之日,正是重新學習之時。新時代要求教師具備的不只是操作技巧,還要有直面新情況、分析新問題、解決新矛盾的本領。在學校領導的指引下,我積極投身于學校教科研,被學校聘為教科員,協助教科室開展教學研究工作。在朱玉棣老師的指點下,成功申請了市級課題《綜合實踐活動設計模式的研究》,由我執筆撰寫了《東萊中心小學綜合實踐活動課程方案》,我的活動方案《奔向二00八》也被選送蘇州。2003年4月,在學校領導和市教研室傅強老師的指導下,綜合實踐活動課題組研討活動在我校順利開展,并取得聽課老師的一致好評。去年4月,我參加了全國首屆智慧學術研討活動,論文《大成智慧學與教育信息化》獲準大會交流,并入選學術研討會論文集,現被張家港市智慧研究所聘為研究員,參與了國家級課題《智慧學理論在教育中應用研究》方案的撰寫。
二、做一個富有愛心的教師
愛學生,就必須善于走進學生的情感世界,就必須把學生當作朋友,去感受他們的喜怒哀樂。愛學生,要以尊重和依賴為前提,要做做到嚴中有愛、嚴中有章、嚴中有信、嚴中有度。我經常從小處著手,從學生關心的事尋求最佳教育時機,給學生春風沐浴般的教育。我的工作隨筆《教育,從尊重學生的個性開始》《實施“心情教育”培養健康心理》《一瓶鋼筆水引起的思考》《再富也不能富孩子》在張家港日報《家庭教育》月刊上相繼發表。其次,我和家長也積極共同探討教育孩子的方法,使家長的教育更具理性。我的實踐《別開生面的家長會》在《關心下一代周報》上發表,并在該社當年上半年好稿件評選中獲二等獎。我的思考《家庭教育中的素質教育》在張家港日報《家庭教育》月刊刊登。
三、做一個理念新的教師
目前,新一輪的基礎教育改革已經在張家港市全面推開,在認真學習新課程理念的基礎上,結合自己所教的學科,積極探索有效的教學方法。在數學課上,我把數學知識與學生的生活相結合,為學生創設一個富有生活氣息的學習情境,同時注重學生的探究發現,引導學生在學習中學會合作交流,提高學習能力。在信息技術課上,我一改以往教師演示、學生模仿的傳統教學方式,在學生中開展探究式學習,使學生的知識來源不只是老師,更多的是來自對書本的理解和與同伴的交流,促使學生在學習中學會學習。我在實踐的同時,也不忘時刻反思自己的教學行為。教學設計《展現變化規律 激發主動發現》在市小學數學教學案例論文評比中獲一等獎,論文《小學數學教學探例》《“圓柱的認識”教學案例對比分析》《中小學信息技術課堂教學初探》《小學信息技術文字處理單元教學設計》《論新課程標準下的信息技術教育》《當教學設計面對新課標》相繼發表。2002年12月,在市小學信息技術教師基本功競賽中獲一等獎。
四、做一個信息時代的教師
1、打造一流商業銀行,關鍵是要樹立精品服務的觀念
商業銀行作為“窗口”服務單位,服務質量的好壞,直接關系著銀行的生存和發展。完善服務功能、提升服務水平既是商業銀行贏得市場競爭力的關鍵,也是商業銀行落實科學發展觀要求、打造現代精品銀行的重要舉措。
2、打造一流商業銀行,關鍵是努力營造和諧的內外部發展環境
在營造和諧的外部發展環境方面,要密切銀政關系,牢記地方銀行宗旨,全力服務于地方經濟。合理增加信貸資金投入,通過積極支持城市基礎設施和重點項目建設,大力促進縣域經濟繁榮發展,推動全市經濟社會又好又快發展,用實際行動贏得政府的重視和信任。
3、打造一流商業銀行,關鍵是科學規劃發展目標加快做大做強商業銀行步伐
科學發展觀的第一要義是發展。科學發展觀要求的發展,是好中求快、又好又快的發展,是速度與結構、質量、效益相統一的發展,是長期、穩定、協調、可持續的發展。
二、以客戶為本,提高全員對服務工作的重要性認識與服務質量的差異對客戶忠誠度的影響。
1.以客戶為本,提高全員對服務工作的重要性認識
近年來,我行為客戶的服務已逐步從單一片面走向整體、全局,并進一步向多元、一體化發展,為我行的各項業務發展起到了極大的促進作用。但面臨金融業面臨的挑戰和加強銀行同業競爭力的需要,我行的服務工作還存在一些欠缺,服務流程大多停留在內部管理和柜臺服務上,服務還不夠規范,并缺乏活力,以客戶為中心的理念還沒有真正落到實處。在銀行業競爭日益激烈的今天,如何向客戶提供真正的個性化服務和規范化服務,如何在瞬息萬變的市場中留住老客戶、爭取新客戶,已成為我們服務工作中必須面對的問題。對此,我們首先要認識到客戶資源將是未來市場競爭至關重要的資源,目前和今后很長一段時間內,市場激烈競爭使得許多金融產品的品質區別越來越小,產品的同質化傾向越來越強,已很難找出差異,更難分出高低,因而要轉向爭取客戶,進入以客戶為中心的服務,將服務作為發展和穩定客戶、增強客戶忠誠度和依存度的重要手段。
2.服務質量的差異對客戶忠誠度的影響
顧客忠誠度是銀行獲利能力的決定性因素。近**年來,國際銀行業的發展證明,顧客忠誠度對利潤的影響較市場份額更為舉足輕重。忠誠顧客的多少在很大程度上決定了市場份額的“質量”顧客滿意度的提高能促進顧客忠誠度的提高。顧客的忠誠源于他們對銀行的滿意。銀行只有令顧客滿意,才能獲得顧客忠誠,減少顧客流失。顧客滿意度是顧客對其質量和預期質量進行主觀比較的結果。
三、構建企業服務文化的方法、手段與如何做到以心換得心,以情換得情。
隨著國內金融市場進一步放開,銀行業改革逐步深化,在對服務業要求越來越高的今天,如何贏得客戶的青睞和口碑,各家商業銀行法寶使盡,可歸根到底都離不開“服務”二字。在長期的經營管理中,商業銀行深刻認識到,現代商業銀行盈利能力的強弱,取決于銀行為客戶創造價值的能力大小,即客戶的滿意度和忠誠度;要真正做好服務工作,首先要把淺層的服務禮儀,升華為深層的服務文化,惟有文化才能使企業生生不息。堅持完善服務措施、健全制度建設。近年來,制定實施了一系列文明優質服務規章制度,明確了服務標準、操作規程和評價體系,初步形成激勵約束機制;規定了開展服務的工作方法和具體措施,規范了處理客戶投訴的工作程序。上述規章制度的建立,統一了服務程序,規范了員工操作行為,明確了服務評價標準,促進了文明優質服務的規范化、標準化。
四、在構建企業文化中如何提升員工服務素質與支撐員工真情服務客戶的源動力。
全面提升營業廳服務形象,由內而外的提升營業廳服務品質,課程從四個方面出發:
1.端正一線服務人員的服務態度與服務意識,了解服務的價值與意義
2.掌握標準的服務禮儀與標準的服務禮貌用語
3.學習與客戶溝通的技巧、很多一線的投訴是由于溝通不暢造成的
4.投訴處理的基本方法及面對不同客戶需求時的應對方式。
五、對提升銀行服務工作的建議,服務是一項具有長期性的系統工程,作為縣支行,如何豐富服務內涵,讓客戶有賓至如歸的感受。
我們要將服務作為全行的基礎性工作和戰略性任務來抓,以“三個代表”重要思想為指導,以人為本,以滿足為客戶、企業提供個性化、簡便的金融服務為準則,以客戶的“滿意度”為標尺來進行,不斷提升服務水平和服務藝術,追求超值服務,提升服務檔次,形成系統服務的品牌,逐步實現由“銀行的服務”向“服務的銀行”轉變,以客戶滿意度最大化為目標,塑造我行良好的現代商業銀行形象。
1.是要把規章制度的執行做真做實。規章制度的執行是提高優質文明服務的基礎,要把規章制度的執行做真做實,就必須在實際工作中把規章制度傳達到位、落實到位、執行到位,要確保辦理的每一筆業務嚴格按照規章制度,業務流程操作。
2.是要把業務技能的學習做深做久。業務技能是辦好每一筆業務的基礎,是決定客戶等待時間長短的主要因素之一。所以每一位員工必須在業務技能的學習上要做到不斷更新,堅持長久,持之以恒。
如何跨越整合理念、技術以及策略的高門檻,并在新課程教學實踐中,不斷開拓創新,實現有效整合與高效整合,真正惠及各學科的教育教學,促進信息化背景下師生的同步發展,我校在整合理念、技術應用以及資源建設等方面引進了概念圖這一先進的工具。
概念圖是上世紀60年代美國康奈兒大學諾瓦克教授等人,根據奧蘇貝爾學習理論提出的一種教學工具和思維工具。在西方國家,概念圖在中小學教學中運用非常普遍,有著很好的教學效果。目前隨著建構主義、認知主義學習理論的發展,尤其是以Inspiration為代表的,一批功能強大的概念圖繪制軟件的普及與推廣,概念圖的時代特征更為明顯,在教育教學領域的運用更加廣泛,它不僅可以用來評價學習,建構知識,進行頭腦風暴,合作交流,促進意義學習,還可以用來進行網絡課程開發、信息化教學設計及整合教學課件制作等,作為指導師生整合教學的實用性工具化平臺的價值日益顯現。
概念的界定
概念圖是一種用節點代表概念、連線表示概念間相互關系的圖示方法,是一種嶄新的教學工具和思維工具。“以概念圖為支架的整合教學”是指以概念圖基礎理論為指導,以概念圖應用軟件為基礎性整合平臺,并可實現與信息化媒體資源,以及Blog、Moodle等信息化專家平臺多元整合的教學形式。
理論與實踐基礎
主要理論基礎是認知主義學習理論和建構主義學習理論以及信息技術和腦科學現論。
研究的主要內容
(一)運用概念圖提升整合教學能力的師訓研究
課題組從概念圖在整合教學中的應用實踐出發,通過報告、示范、展示、研討、評優競賽與網絡研習等活動,結合自我反思、同伴互助與專家引領等行動研究,進行有針對性的培訓;并輔助以考核、激勵等策略,點面結合,分層遞進,整體提升教師運用現代教育技術的能力。
(二)概念圖在整合教學中的應用策略研究
深化概念圖的理論研究,從教與學兩方面梳理概念圖與教學的內在聯系,發掘并拓展概念圖在整合教學環境中的功能與應用方式。按學科分類下設11個二級子課題,通過概念圖在不同學段與不同學科中的運用,探索和形成可推而廣之的應用策略,指導和優化以概念圖為支架的整合教學實踐。
(三)概念圖在整合教學中應用模式的建構
以概念圖軟件Inspiration為整合教學實踐的基礎平臺,積極探索這一軟件與信息化教學資源的整合方式,同時重點研究概念圖Inspiration與Blog、Moodle等信息化專家平臺的有效融合。
研究的主要成果
(一)探索并總結了概念圖及其軟件Inspiration在教學中的六大應用功能
鑒于概念圖繪制軟件Inspiration良好的易用性和功能性,課題組在深入實踐的基礎上,結合教與學中的各種典型案例,提出并總結出了概念圖及其軟件Inspiration在整合教學中的六大功能:知識可視化的表征功能、高級思維的發展功能、合作交流的媒介功能、促進教學的評價功能、一體化的教學設計與課件開發功能,以及構建網絡課程的設計功能等。
傳統的概念圖通常是用手工繪制的,只要有紙和筆,即可繪出教學需要的各種概念圖。隨著課題研究的推進,目前手繪概念圖已逐步成為師生常態的思維工具與研習策略。實踐表明:師生共繪概念圖不僅僅可以促進教,而且同樣可以有效地促進學,它既可以充當教的平臺,也可以作為學的工具;既可以建構知識與思維路徑,也可以同步發展認知與思維能力。
以概念圖為支架的整合教學實踐表明:作為一款集整合技術、功能、理念與應用策略為一體的信息化專家平臺,概念圖Inspiration軟件的推廣與普及,能夠有效促進信息化背景下師生的快速成長,符合教育信息化建設與發展的現實需求。
(二)總結并提出了概念圖及其軟件Inspiration與課程整合的兩大操作策略
策略一:“放眼網絡、內外整合”的信息化教育資源建構策略
課題組積極地引導教師把目光投向網絡,重點依托互聯網免費性、共享性資源,以及學科軟件平臺,提升信息化資源建構的針對性和實用性,引導把教師有限的時間放在資源的合理選擇,以及與課程的有效整合的設計上,從而極大地解放了教師的勞動,有力保證了整合教學的質量和效益。
如生物教學中引入的Flasteethwise,不僅可以幫助學生通過互動探究認識牙齒、組裝牙齒,而且還可以練習如何正確刷牙等,很有趣味性;如在數學圖形教學中引入的七巧板Java動畫資源軟件,可以讓學生自主選擇多樣化的造型,嘗試各種拼接技巧,同時還提供涂色美化的功能,學生非常喜歡;再如在物理光的色散教學中引入的Shockwave動畫資源,不僅可以定性地比照各種色光透過棱鏡后的偏折情況,而且還提供了偏折角度的測量工具,幫助學生進行定量研究;他們在彌補學生直接經驗和生活體驗不足的同時,也豐富了教學互動過程,有力支撐了新課標各學科的教與學。
策略二:多元教育信息化專家平臺整合策略。
同概念圖軟件Inspiration一樣,博客、魔燈以及一些學科類的教育軟件,功能強大且簡單易學,是實實在在的教育信息化專家平臺。但是這些平臺往往各具優勢與不足,多元教育信息化專家平臺整合策略旨在通過以概念圖為支架的多元平臺整合,取長補短,彌補概念圖單一平臺在整合教學中可能存在的功能不足,拓展優化概念圖的資源開發功能、網絡互動功能與課程開發功能。
(三)基于Inspiration等信息化專家平臺與課程整合的模式初步形成
本課題組在探索與實踐的過程中,并沒有一味地糾纏于空泛的理念、策略以及純粹的技術培訓與灌輸,而是獨辟蹊徑,通過引入技術零障礙,但又飽涵當今先進教育理念與策略的概念圖Inspiration、博客Blog、摩燈Moodle等信息化專家平臺,幫助廣大一線教師又一次快速成功地跨越了整合技術、理念以及策略的“高門檻”。
Blog具有很好的互動特征,但由于本身技術的限制,它的頁面結構和呈現方式,則明顯遜色于Inspiration的表現。鑒于此,課題組在網絡教學實踐中成功引入整合策略,實現了Inspiration和Blog兩個零障礙專家平臺的優勢互補。借助于Inspiration與Blog的課外整合,有效打破了時空等因素的制約,實現了隱性課堂顯性化,封閉課堂網絡化,靜態課堂動態化,交互形式多樣化,教師同行之間也可以通過網絡課件與Blog進行深度研習和交流反思,有效推進教師網絡教研共同體建設,促進教師隱性知識顯性化,最大限度地提升課堂教學的共享度。
相對于Blog而言,Moodle在教育教學領域則顯得更為專業,功能也更為強大。不僅在信息管理方面支持的類型更為豐富,而且最為突出的是,互動形式不再僅僅是簡單的回復,還可以是投票、討論、測驗、評價、問卷調查等,既可以很好地滿足網絡課堂教學的需要,又可以在遠程網絡教學與管理方面游刃有余。而且概念圖Inspiration與Moodle的整合也有利于改變Moodle課程界面過于線性化、單一化的不足,課題組相信隨著教育信息化建設的持續推進,Inspiration 和 Moodle 與網絡教學的整合可能會成為一個新的亮點,值得期待。
當然隨著整合教學的發展和需要,網絡互動平臺也會不完全局限于Blog和Moodle,教學中教師們可以結合整合的理念加以發展和充實,但是就現階段而言,這兩個平臺應該是當下乃至今后較長一段時間內的網絡互動平臺的首選,因為它們既不需要額外的經費,也沒有高難度的技術培訓,但是確功能強大,非常適合整合教學的現實需要。
(四)以概念圖為支架的整合教學師訓策略與模式日趨完善
課題研究與發展的過程,也就是教師培訓與發展的過程,在啟動階段,課題組主要圍繞與概念圖有關的理論專題研習、技術培訓展開工作。整理了《概念圖參考文獻專輯》,涉及國內外核心期刊發表的數十篇文章,供教師學習參考,有效更新了教師的教育理念,深化了對概念圖理論的認識和理解,學校每學期均組織2次以上的專題學習,有效推進了以概念圖為支架的整合教學逐步走向深入。
在手術室進行術前準備時,發現患者呼知不應,觸摸頸動脈沒有搏動,呼吸停止,血壓測不出。立即行胸外心臟按壓,同時給予氣管插管,手控擠壓呼吸囊。靜注1mg腎上腺素。快速輸注晶體液,2U濃縮紅細胞,靜輸多巴胺和間羥胺。2分鐘后心肺復蘇成功,心率116次/分,呼吸25次/分,血氧87%。馬上進行手術,加壓輸入濃縮紅細胞,接呼吸機,使用安氟醚、芬太尼、維庫溴銨行全身麻醉,使患者處于淺麻醉狀態。開腹后發現腸系膜破裂,腸破裂,先結扎出血的血管再行腸破裂修補術。術中繼續抗休克治療,給予生理鹽水2000毫升,羥乙基淀粉130 1500毫升,濃縮紅細胞1600毫升,氟美松20毫克,碳酸氫鈉200毫升。術中維持血壓95/60mmHg,心率89次/分,血氧飽和度100%。手術順利,歷時1.5小時。術畢患者自主呼吸恢復后帶氣管導管送麻醉恢復室。約1小時后患者清醒,拔除氣管導管送回病房。
術后第1天回訪,患者輸注1000毫升血漿及1000毫升濃縮紅細胞后,血壓100/60mmHg,心率76次/分,血氧飽和度98%,呼吸18次/分。血紅蛋白89g/l。無麻醉并發癥。10天后患者痊愈出院。
討論 該患者懷疑臟器破裂,出血性休克,在手術前突然出現心臟驟停,研究表明:4分鐘內開展初期復蘇,8分鐘內后期復蘇,病人存活率為43%;8-16分鐘內開始后期復蘇,存活率僅為10%;8-12分鐘內開始初期復蘇,存活率為6%。[1]該患者心肺復蘇成功,不僅沒有出現任何臟器功能障礙,而且患者術后生活質量沒有任何影響。能有此結果,完全得益于搶救及時,心跳和呼吸只停止2分鐘,“時間就是生命”在此患者身上得到充分的體現。該患者因為傷及大血管出血迅猛,這種情況下行胸外心臟按壓,必須保證給予充足的液體,尤其血液供給。胸外心臟按壓,稱之為胸腔泵的機制,按壓主要引起胸內壓力增高,胸內動脈,靜脈,以及胸腔外的動脈壓亦相應增高,但周圍靜脈壓力仍然是低的,從而形成周圍動靜脈的壓力梯度,使血液自動脈流向靜脈,形成回流。[3]如果血管里沒有血液,那么心臟按壓是徒勞的,必須補足液體量。對情況緊急的大失血病人,只有手術止血才能挽救生命者,需在休克狀態下手術,此時不宜過多強調術前準備,與家屬做好充分的溝通,要在手術的同時繼續抗休克治療。絕大部分全麻藥都有或輕或重的抑制循環功能,因此全麻維持期間,由于休克病人不能耐受深麻醉,全麻藥物的用量應減少,維持在淺麻醉水平,借助肌松藥的作用,以滿足手術要求。[1、2]
參考文獻:
二、調查的具體目標、調查對象及操作方式
本次對我校高年級學生,語文學科喜歡程度性別差異的調查,目的是通過對我校高年級學生對語文學科的學習態度、情感、行為進行調查,了解我校高年級學生對語文學科喜歡程度的真實情況,找到形成學生差異性的原因,為今后語文教師更有效地提高學生學習語文的興趣,讓每個學生都學好語文學科提供有效的依據。
(一)具體目標:
1、小學高年級學生對語文學科喜歡程度的性別差異。
2、小學高年級學生對語文學科喜歡程度性別差異形成的原因及對策。
(二)調查方法
此次調查采用了問卷調查和訪談法。
1、問卷內容涵蓋學習情感、學習態度、學習行為三個方面,問卷共出題20個,對其中16個小題進行了賦值,每個小題三個答案,分為三級水平,一級為5分,二級為3分,三級為1分,共計80分。共發出問卷489份,最后收回480份。(問卷略)
2、座談會采用個案調查、整體調查,共召開八次教師座談,八次學生座談,這些座談會不僅為我們提供了大量生動的典型材料,而且為理性分析提供了基礎。
(三)用一學期語文期末考試成績做語文學科成績與性別的相關分析。
三、問卷結果分析
1、學生對語文學科的情感:調查顯示,學習語文學科給學生帶來的愉悅感,小學高年級男同學明顯不如女生。女生有73%的學生對語文學科的有關訓練能夠很感興趣,有強烈的愿望,愿意學習,能夠達到很喜歡,而男生只有45%的學生達到一級水平,還有4%的男生為三級水平,他們對語文學科的有關訓練不喜歡,是被動的。
2、學生對語文學科的學習態度;調查結果表明,在對語文的學習態度上,男女生差異更大。從一級水平來看,男生達到一級水平的為37.7%,而女生一級水平則為80.3%,女生對語文學科的學習熱情高,作業做到認真,上課積極回答問題,并經常補充課外知識,,值得注意的是男生14.9%的學生為三級水平,他們對語文學科的學習有更多的無奈,沒有積極性、主動性,害怕語文學習的男生占相當份額,而女生卻沒有三級水平。
3、學生對語文學科的學習行為;調查結果顯示,在語文學科采取的行為上,男女生也有明顯的差異,男生達到一級水平的為59.6%,而女生則為69.3%,有5.55%的男生為三級水平,而女生仍舊沒有三級水平。一部分男生由于沒有良好的預習、復習、作業習慣,對于語文有關知識的學習就不能較好地掌握,不能順利地、按質按量地完成相應的作業,甚至有時會在無奈的情況下抄襲別人的作業,長此以往,這些男生對語文學科的學習則會慢慢產生厭煩的心理。
四、對調查結果的思考:
通過此次調查結果分析,發現小學高年級學生對語文學科的喜歡程度有明顯的性別差異,即男生明顯不如女生喜歡需文學科,其成因有以下幾點:
1、男女生性格差異是造成部分男生語文知識掌握不牢固,從而影響學生學習語文的興趣的原因之一。男同學喜歡靈活多變、動手能力強的作業,而對于抄寫、讀、識記等類型的作業則不喜歡做,從而造成他們在低年級的識字過程中,對知識掌握不牢固而落伍,也就給今后的語文學習造成了一定的障礙。
2、教師教學方式的滯后,也是造成學生不喜歡語文學科的原因之一。活動好動是兒童的兒童天性,他們喜歡玩、喜歡笑,男同學更是喜歡生動有趣的課堂,開放而有樂趣的作業,可語文教師卻還一味地站在講臺上,無休止地講解著,學生被動地接受著填鴨給的知識,一遍又一遍低抄寫著枯燥無味的生詞,他們覺得語文課是一個乏味的課堂,因此,他們失去了學習語文的興趣,對語文學科的學習更多的是逃避。
3、教學內容離學生生活較遠,不易理解,使學生不愿意學習語文。教材內容離學生生活較遠,學生理解起來很困難,使學生們學起來很困難,尤其是男生,反應更加強烈,在學生座談中反映突出。久而久之,男同學,也就失去了對語文學科的學習興趣。
五、辦法與對策:
1、要求教師要努力學習教育學、心理學的有關知識,了解兒童心理特征及性別差異,從而達到所選用的教學方法遵循教育規律,提高教學效果。
2、要求教師要努力進行教育教學改革,采用靈活多樣的教學方法,激發學生的學習興趣,培養學生良好的學習習慣,努力創設良好的自主學習情境,尊重學生個體差異,鼓勵學生選擇適合自己的學習方式,讓學生真正成為學習的主人。
3、要求教師加強教學理論的學習與研究,提高自己的理論水平,從而更好地指導自己的教學。
4、加強對教師的教育,讓教師擺脫過去形成的被動性,扭轉教師在改革中的消極等待態度,讓教師主動參與教學改革。
5、關注男同學中的那部分特殊學生,多關心他們的思想和學習,經常同他們平等交談,了解其思想上、學習上存在的問題,幫助其分析原因,制定學習計劃,鼓勵他們“敢想”“敢問”,激發他們學習的興趣。
6、努力研究語文家庭作業的形式,把自主設計在家庭作業中,讓學生根據自己的實際情況選擇適合自己的作業形式、數量、實踐方法,可以讓學生與爸爸、媽媽、同學合作完成;把生活設計在家庭作業里中,用生活豐富家庭作業;把興趣設計在家庭作業中,如:畫一畫、坐一坐、顏一煙、查一查等。
關鍵詞:問題解決方法;學習者自主性;行動研究
Abstract
The ultimate aim of action research on learner autonomy is how to help learners to become more autonomous and better in language learning. The article reports an action research on fostering the students’ learner autonomy by using the problem-solving method in the English classroom. Through a questionnaire survey, an interview and theclassroom observations, it is found that the students’ strategies such as task-awareness, attribution, input and output, motivation, analysis and deduction, self-belief, motivation and self-concept are quite strong, but their risk-orientation, self-awareness, asking questions, self-monitor, self-evaluation, self-monitor, reinforcement and co-operation are quite weak. It is also found that society; cultural psychology, language competence, teaching management and language learning materials influence the students’ learner autonomy. In order to foster the students’ learner autonomy, a series of class scaffolding activities are designed and used in the English classroom for one and half a year according to Howard Gardner’s theory and Dr. Bilash’s Success-based Language Instruction Model. The major results show that the students’ learner autonomy is greatly improved and their language knowledge and skills are enhanced.
Keywords: problem-solving method, learner autonomy, action research
1. 引言
外語教學的成功與否不只是一個教的問題,在很大程度上取決于學生的學習態度和方法
。近年來,外語教學研究的發展趨勢從客體轉移到了主體,人們越來越重視學習者在外語學 習中的主觀能動性和創造性。學習者在語言學習過程中的積極主動作用已得到母語習得研究 和外語學習研究的證實。在貫徹“以人為本”和“終生教育”理論的大背景下,我國越來越多的 外語教育工作者意識到培養“學習者自主性”(learner autonomy)的重要性。此外,不少研究 表明,由于受傳統教育模式的影響,我國許多學生自主學習能力較差。因此,如何促進外語 學習者自主性以提高外語教學質量,已經成為了國內外外語教育界研究的熱點,也是今后外 語教學的新趨勢。
在國外,著名學者Benson(2001:111)圍繞兩個關鍵問題,即“與學習者自主性有關的實 踐是如何促進學習者自主和如何提高語言學習的?”,把促進學習者自主性的方法歸納為以 下六種:第一種是基于學習材料的方法(resource-based approaches);第二種是基于教育技術 的方法(technology-based approaches);第三種是基于學習者的方法(learner-based approaches)
;第四種是 基于課堂的 方法 (classroom-based approaches) ; 第五種是基 于課程的方 法 (curriculum-based approaches);第六種是基于教師的方法(teacher-based approaches)。他同時 指出,到目前為止,許多與學習者自主性有關的研究大多基于反思和推理,很少有基于對數 據的系統分析的研究。因此,基于數據的行動研究是以后研究的重點。
國內學者對“學習者自主性”的討論始于20世紀80年代中后期(徐錦芬等,2004),所 有學者都肯定了培養“學習者自主性”在英語教學中的積極意義,并從不同角度探討了自主學 習能力的培養途徑。目前,國內對“學習者自主性”的研究主要介紹國外的有關理論知識,只 有一些研究者如:王篤勤(2002)、徐錦芬等(2004)開始探討一些教學模式,并進行實證研 究。何曉東(2004)認為,今后關于外語“學習者自主性”(LA)的研究應過渡到以實證研 究為主,同時,應緊密結合國內大學英語教學的實際開展研究、討論。綜觀國內外學者的研
究成果發現,對如何促進“學習者自主性”的方法和手段主要有:大綱和課程設置、課堂教學
、外語學習環境、專門的策略培訓、自主學習中心、多媒體輔助教學、遠程教學等。 許多研究表明,“學習者自主性”與學習策略密切相關。“問題解決”是學習策略的一種形
式,是近年來國際教育界發展起來的一種教學方法和教育思想。“問題解決”要求教師為學生 創造具體環境,啟發和激發學生獨立提出探索性及求證性問題,形成多向思維的意識,尋找 在不同的條件下的多種解決問題的途徑,探索可能出現的多種答案。因此,“問題解決”是培 養和發展學生創造性思維能力的重要教學方法和教育思想。
那么,學生在課堂學習英語的過程中,遇到什么問題呢?任課教師如何發現這些問題 并找出解決這些問題的辦法呢?本文采用行動研究方法在英語課堂教學中探索學生英語學 習過程中遇到的問題以及解決問題的辦法,目的是促進外語學生的“學習者自主性”,最終的 目的就是大幅度地提高英語教學質量。
行動研究法是一種適應小范圍內教育改革的探索性的研究方法,是針對教育活動和教 育實踐中的問題,在行動研究中不斷地探索、改進和解決教育實際問題。行動研究將改革行 動與研究工作相結合,與教育實踐的具體改革行動緊密相連。行動研究法產生以來,人們除 了公認行動研究法是一種擴展的螺旋式結構外,對于實施的具體步驟提出了各自不同的看法
,本人主要采用六步驟模式。六步驟模式具體步驟為:預診——收集資料初步研究——擬定 總體計劃——制定具體計劃——行動——總結評價。
1、預診:這一階段的任務是發現問題。對學校工作中的問題,進行反思發現問題,并 根據實際情況進行診斷,得出行動改變的最初設想。在各步驟中,預診占有十分重要的地位
。
2、收集資料初步研究:這一階段成立由教研人員、教師和教育行政人員組成的研究小 組對問題進行初步討論和研究,查找解決問題的有關理論、文獻,充分占有資料,參與研究 的人員共同討論,聽取各方意見,以便為總體計劃的擬定做好診斷性評價。
3、擬定總體計劃:這是最初設想的一個系統化計劃。行動研究法是一個動態的開放系 統,所以總體計劃是可以修訂更改的。
4、制定具體計劃:這是實現總體計劃的具體措施,它以實際問題解決的需要為前提, 有了它,才會導致旨在改變現狀的干預行動的出現。
5、行動:是整個研究工作成敗的關鍵。這一階段的特點是邊執行、邊評價、邊修改。 在實施計劃的行動中,注意收集每一步行動的反饋信息,可行的,則可以進入下一步計劃和 行動。反之,則總體計劃甚至基本設想都可能需要作出調整或修改。這里行動的目的,不是 為了檢驗某一設想或計劃,而是為了解決實際問題。
6、總結評價:這是對整個研究工作的總結和評價。這一階段除了要對研究中獲得的數 據、資料進行科學處理,得到研究所需要的結論外,還應對產生這一課題的實際問題作出解 釋和評價。
從上述行動研究法的六個步驟中可以發現三個明顯的特征:一是具有動態性,所有的 設想、計劃,都處于一個開放的動態系統中,都是可修改的;二是較強的聯合性與參與性, 研究者、教師、行政人員的全體小組成員參與行動研究法實施的全過程。三是在整個研究過 程中,診斷性評價、形成性評價、總結性評價貫穿于行動研究法工作流程的始終。
2. 研究方法
2.1 研究背景
南寧師范高等專科學校2006級英語教育專業三個班級共91名學生,課程為《綜合英語 課》,行動環境為實際課堂教學,使用的教材為高等教育出版社出版的《綜合英語教程》第 一、二冊。執行者為本人。項目時間:2006年9月至2008年1月。
2.2 預診
在2006年秋季學期初的課堂教學實踐中發現學生雖然對綜合英語教學很感興趣,但是絕 大部分學生不能主動地預習和復習功課,不主動參與教師組織的課堂活動,不能按時提交作 業且正確率很低,沒有什么學習計劃,合作學習的能力差。根據學生的表現提出了一下假設
:絕大部分學生自主學習能力差。 為了驗證提出的假設,本研究采取問卷調查、訪問與課堂觀察相結合的方法。問卷調
查和訪問使用了張立新和李霄翔(2004)設計調查問卷和問題,抽樣調查了26名學生。通過 問卷調查、訪問和課堂觀察,試圖發現本項目研究者所教的學生在哪些方面自主能力欠缺, 哪些方面較強,發現其中的原因。課堂觀察主要觀察學生的學習表現,包括語言表現、對提 問的反應、參與活動的積極程度、課堂討論的情況等等。
表1問卷調查結果(按照均值從小到大排列)
對問卷調查結果進行分析,得出以下結論:
(1)整體能力較強項 學生在以下幾方面較強(接近或超過4分):任務評價、歸因、輸入輸出、分析推理等、自
我信念、動機,自我信念,自我效能。
(2)整體能力較弱項 從問卷調查的數據來看,學生在以下幾方面有待加強(低于3分):冒險,自主意識,提問
,自我監察,自我評價,加強,合作。
(3)課堂觀察和訪問結果 為了探索以上問卷調查初步發現的自主能力差異的原因,我們進行了課堂觀察和訪問
,結果發現,社會、文化心理、語言能力、教學管理等因素會影響自主學習能力。
(4)確認問題:大部分學生自主學習能力差的主要原因之一是受社會、文化心理、語言 能力、教學管理、語言學習材料等因素的影響,學生的學習策略沒有得到全面均衡發展。
2.3 擬定總體計劃
為了提高學生的自主學習能力,項目研究者基于美國學者霍華德 加德納(Howard Gardner)博士的多元智能理論和加拿大Bilash博士的“成功語言教學模式”,并根據英語教育 專業的特點,從備課、可理解性語言輸入、語言吸收和鞏固、語言的輸出、形成性評價和終 結性評價等五個方面,按照由淺入深、循序漸進的原則,根據學生的實際情況,分級設計了 一系列的旨在提高學生自主學習能力的課堂活動,吸引學生積極參與,培養學生合作學習的 能力,使每個學生都有成就感。
2.4 制定具體行動計劃
第一步:建立個人檔案,通過個人檔案獲得學生信息和對學生做出評價已經成為重要 的趨勢。教師通過觀察學生學習過程,了解每個學生的學習特點、學習風格及其策略和方法 等情況,不斷調整教學方法。同時,學生在其檔案中可以進行比較,了解自身發展的進程。 為了了解和掌握所教班級學生的英語水平、英語學習經歷,項目研究者參照《多語和多元文 化的歐洲》(1997-2000)和《歐洲語言檔案手冊》(European Language Portfolio-Junior version)
,制定了每個學生的個人檔案,主要包括語言通行證(Language Passport),語言傳記(Language Biography),和語言檔案(Language Dossier),主要用于讓學生自我了解各階段學習情況 和記錄學生語言技能發展,供下一階段學習或教學參考。
第二步:根據學生的英語水平和Gardner的多元智能理論,項目研究者分四個等級(初 級:elementary, 中下級:lower intermediate, 中級:intermediate和高級:advanced)設計了語 言文字智能(Linguistic intelligence )、數學邏輯智能(Logical-Mathematical intelligence)、視覺 空間智能(Spatial intelligence)、身體運動智能( Bodily-Kinesthetic intelligence)、音樂旋律智能
( Musical intelligence )、人際關系智能( Interpersonal intelligence)和自我認知智能(Intrapersonal intelligence)等七大類的課堂教學活動, 如:Getting to know one another, Biographical, Bingo, Idioms, Noticing, Roll the dice,A fun reading comprehension activity,English songs, Teaching
activities, Dictation activities, Spring festival, The year of 12 animal signs, Jigsaw reading activities, Self-study in the computer center, Matching pairs activities, Home reading and retell
activities,Posters, Advertisements等。每個具體的課堂活動都有一系列的步驟構成。
第三步:在課堂教學過程中,交替實施具體的七大類課堂活動,使學生從教師完全控 制逐步向學生自主地完成所有的課堂活動過渡,最終實現學生完全自主的完成任務。
3. 結論與討論
我們運用以下幾種方法收集經過三個學期的行動研究教學效果,并得出以下結論:
3.1 個人檔案
通過分析所教班級學生的三個學期的個人檔案,得出以下結論:第一、從學生語言通 行證中的學習進步表格的填寫上看,有44%的學生聽、說、讀、寫等水平從A1-Grade 2 升到
B1-Grade 8, 有31%的學生聽、說、讀、寫等水平從A1-Grade 1 升到B1-Grade 7, 有25%的學 生聽、說、讀、寫等水平從A1-Grade 3 升到B1-Grade 9。這些數據表明,經過三個學期的課 堂教學活動,絕大多數學生的英語水平得到了很大的提高。第二、從學生語言通行證中的學 生跨文化的經歷看,大多數學生從原來的不敢、不愿意與外國人面對面、E-mail、信件、賀 卡交流等方式交流轉變到了愿意、敢與不同文化的外國人進行交流活動。第三、從學生的語 言傳記來看,大多數學生的英語學習方式、方法和策略得到了極大的轉變,在語言學習方面 的進步也非常顯著。第四、從學生的語言檔案來看,學生不僅積極參與具體的七大類課堂活 動,而且在課內外都能夠組織和運用這些課堂活動,學生的知識面不斷擴展。
3.2 課堂學習記錄
從課堂學習記錄可以看出,從第一個學期的第三周開始,85%以上的同學能按時預習和 復習功課,并積極參與老師組織的課堂活動,合作學習的能力有了很大的提高,79%的學生 能按時提交作業。
3.3 考試成績
從三個學期的期末考試成績看,所教的三個班級綜合英語成績平均分比同級別同類專 業的班級高了7分。
3.4 調查問卷
從三個學期問卷調查的數據來看,學生在冒險,自主意識,提問,自我監察,自我評 價,加強,合作等方面得到了加強,自主學習能力得到了進一步強化。
3.5 反饋練習結果
從每次上課后的反饋或反思的練習結果看,87%的學生成績都達到良好以上,對課堂 活動的評價和任課教師的評價也比較好。
3.6 存在問題
通過收集到的數據,可以看出我們的行動研究方案取得了一定的效果。由于計劃周密、 教學設計合理,這在一定程度上激發了學生的語言學習動機和學習興趣,同時培養了學生自主 學習能力,大部分同學的語言知識和語言技能有了一定程度的提高,專業技能得到了訓練和 加強。對教師來說,行動研究中學與教、教與研的互動,提高了教師對教學過程的理解和認識, 進一步提高了教學水平。
但我們也發現了一些問題,如:在“男女授受不親”思想的影響下,如何使男女學生融入 到同一個課堂活動中?組織小組活動過程中如何監督學生的參與程度?如何檢測設計的課 堂活動的難度?仍有 7%左右的同學各方面進步不大,這些同學大都性格內向,語言能力和自 控能力差,大多不愿意參加教師組織的課堂活動,不積極主動完成教師所布置的課內外作業,
如何培養這些同學的自主學習能力等。這些問題為我們下一步的行動研究提供了方向。
參考文獻
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2南陽醫學高等專科學校及檔案室基本情況
南陽醫學高等專科學校位于河南南陽臥龍崗上,是我國醫圣張仲景的故里,也是我國三國時期著名軍事家諸葛事家諸葛亮的躬耕地。于2004年經國家教育部批準升格為南陽醫學高等專科學校,是一所培養醫療、衛生、保健、醫藥制造及醫技的技術型的高職高專院校,主要面向農村、縣級醫院及各個藥品制造企業培養合格使用人才。學校檔案室負責收集整理學校各類文書和各類有價值的資料,包括學校上級來文來稿和各處室及附屬部門的上報材料及原始資料。
3重視不夠,資金投入不足
高職高專院校檔案室是高職高專院校的輔助部門,在南陽醫學高等專科學校管理中,連學校二級處室也算不上,隸屬于學校二級部門校黨委辦的下轄科室。長期以來得不到相應的重視,更談不上現代化建設。甚至連對檔案室的工作職責、工作內容、工作方法、工作性質等最基本知識都不了解,更談不上檔案室對學校的發展作用的認識有多深。學校領導重視不夠,資金投入不足是上述困境的主要原因,在此情況下,檔案室信息化建設舉步維艱:截至目前,南陽醫學高等專科學校檔案室各類檔案集中在一個屋子里,無論是分門別類還是通風防潮等各方面均不合格;管理上還停留在上世紀八十年代手工登錄,雖然才建設自動化管理,僅僅是單機自建電子表格形式管理,連一個自動化管理軟件也沒有,特別是在上級來檢查財務工作時,財務檔案中的憑證查找真如大海撈針,費時費工,嚴重影響工作效率。這些都嚴重影響了高職高專院校檔案信息化建設進程。不切實際,信息化建設不科學科學性是高職高專院校培養人才的最基本要求,所以科學性應貫穿于學校的各項工作中,就是高職高專院校的檔案室建設也應遵循科學性,保證檔案室建設的科學、合理、遠見等要求,保證檔案室建設50年不落后。南陽醫學高等專科學校檔案室建設之處沒有征詢學校各部門,特別是校兩辦的意見,沒有根據實際工作需要進行可行性報告,最終導致目前檔案室位置偏僻、空間狹小、管理落后、信息不暢等困境。館藏內容匱乏,信息化資源結構殘缺作為高職高專院校歷史資料的收藏家,檔案室理應在科學的管理體系下,按照規范、科學的架構體系下,對高職高專院校發生的各項業務和開展的各項工作進行全面、完整、系統、規則地記錄和保存,從而保證對高職高專院校歷史的還原。南陽醫學高等專科學校檔案室由于種種原因,致使檔案管理體制和管理機制不科學,檔案信息收集不全,各年度還有零散于部門間,特別是一些教學寶貴資料流落于各系,隨著各系領導班子的更替,個別教學檔案資料丟失時有發生。目前南陽醫學高等專科學校檔案室紅頭文件較多,財務檔案資料齊全,教學文件、學生管理文件、重點建設檔案、科學研究資料等專門檔案較少;傳統紙質檔案多,現代電子檔案少;原始檔案多,加工整理的檔案少,這些嚴重影響了檔案信息化建設步伐。
Effect of Astragalus membranaceus on proliferation and migration of vascular smooth muscle cells induced by high glucose
GAO Hui-juan JIANG Hai-hong
Department of Endocrinology,Daqing Oilfield General Hospital;
Abstract:Objective To investigate the role of Astragalus in the proliferation and migration of vascular smooth muscle cells (VSMCs)induced by high glucose and its mechanism.Methods VSMCs were randomly divided into control group (normal culture),high glucose group(25 mmol·L-1D-glucose),experimental group (25 mmol·L-1 D-glucose+40μg·mL-1 astragalus),transfection group 1 (transfection of negative control oligonucleotide+25 mmol·L-1 D-glucose+40μg·mL-1 astragalus),transfection group 2 (transfected with miR-18a-5p mimic+25 mmol·L-1D-glucose+40μg·mL-1 astragalus).Cell counting kit-8 (CCK-8) assay was used to detect cell proliferation;scratch assay was used to detect cell migration;real-time quantitative reverse transcription polymerase chain reaction(qRT-PCR)analysis was used to detect the expression of miR-18a-5p;Western blot was used to detect mitochondrial fusion protein 2 (MFN2) protein expression.Results The inhibition rates of VSMCs proliferation in control group,high glucose group and experimental group were (100.00±10.00)%,(188.24±18.17)%and (123.52±12.66)%,respectively;the migration rates of VSMCs were (15.16±1.64)%,(53.63±5.27)%and (34.46±3.58)%,respectively;the expressions of miR-18a-5p were 1.03±0.09,1.63±0.15 and 1.36±0.02,respectively;MFN2 protein expression were 1.05±0.12,0.34±0.07 and0.73±0.09.For the above data,there was statistically significant difference between control group and high glucose group,between high glucose group and experimental group (all P<0.05).In addition,the expression of MFN2protein in transfection group 1 and transfection group 2 groups were 0.69±0.08 and 0.43±0.06,and the difference was statistically significant (P<0.05).Conclusion Astragalus inhibits high-glucose induced proliferation and migration of VSMCs by regulating the miR-18a-5p/MFN2 axis.
Keyword:Astragalus; microRNA-18a-5p; mitochondrial fusion protein 2; high glucose; vascular smooth muscle cells; proliferation;
糖尿病患者常見的并發癥是血管病變,這也是造成患者死亡或殘疾的重要因素[1]。成人血管平滑肌細胞(VSMCs)主要是維持血管收縮并調控血管管腔直徑,以此調節血壓的血流分布。在持續高糖狀態下,可促進細胞增殖和遷移,遷移至血管內膜的VSMCs使血管內膜增厚、官腔狹窄,從而導致動脈粥樣硬化的病變[2]。黃芪具有益氣活血、利水消腫的功效,對高血壓伴水腫、心肌缺血及糖尿病均有良好的治療效果[3]。本文旨在研究黃芪對高糖誘導VSMCs增殖和遷移的影響,并分析其作用機制。
材料與方法
1 材料
細胞人VSMCs,購自美國模式菌種收集中心。
藥品與試劑黃芪注射液,規格:每支10 mL(相當于原藥材20 g),批號:180527B2,批準文號:國藥準字Z13020999,購自神威藥業集團有限公司。細胞計數試劑盒(CCK-8),購自上海碧云天有限公司;胎牛血清和DMEM培養基,均購自美國Gibco公司;實時定量反轉錄聚合酶鏈反應(qRT-PCR)試劑盒,購自美國Applied biosystems公司;聚氰基丙烯酸正丁酯(BCA)蛋白試劑盒,購自美國Thermo Fisher公司;抗線粒體融合蛋白2 (MFN2)抗體、抗β肌動蛋白(β-actin)抗體及蛋白質印跡檢測試劑盒,均購自英國Abcam公司。
儀器ABI7500實時PCR儀,購自美國Applied Biosystems公司;Multiskan FC酶標儀,購自美國Thermo Fisher scientific公司;BX53熒光顯微鏡,購自日本Olympus公司。
2 實驗方法
2.1 細胞培養
細胞放置于含10%胎牛血清的培養基中,并在37℃、5%CO2的培養箱中培養,培養24 h后,收集細胞用于實驗。
2.2 細胞轉染前分組及干預[4]
取對數生長期的細胞隨機分為對照組、高糖組和實驗組。對照組不用藥物處理,高糖組用25 mmol·L-1的葡萄糖刺激24 h,實驗組先用40μg·m L-1的黃芪孵育2 h再用25 mmol·L-1的葡萄糖刺激24 h,然后收集各組細胞進行后續實驗。
2.3 細胞轉染及轉染后分組
按照參考文獻[5]方法,將陰性對照寡核苷酸和miR-18a-5p模擬物分別轉染至細胞中,隨后使用40μg·m L-1黃芪及25 mmol·L-1葡萄糖處理,分別命名為第1轉染組、第2轉染組。
2.4 以CCK-8法檢測VSMCs的增殖[6]
將各組VSMCs細胞接種于96孔板中,設置陰性對照組和空白對照組,待細胞貼壁后,加入黃芪進行處理。與細胞共培養48,72 h后,每孔加入CCK-8試劑10μL,并放置于37℃恒溫培養箱中,繼續培養4 h,之后使用酶標儀檢測波長為450 nm處的光密度(OD)值。細胞存活率為實驗組與對照組OD值的比值。
2.5 以劃痕實驗檢測VSMCs的遷移情況[7]
細胞處理24 h后,用胰蛋白酶消化細胞,在6孔培養板背面每隔0.5 cm處畫線,分別向每孔加入5×105個細胞,培養過夜,用移液器槍頭垂直劃痕,PBS溶液沖洗劃下的細胞,置于37℃、5%CO2環境下培養,在0,24 h取樣拍照,用Image J軟件測量記錄劃痕寬度的變化。細胞遷移率(%)=(0 h劃痕寬度-24 h劃痕寬度)/0 h劃痕寬度×100%。
2.6 以實時定量反轉錄聚合酶鏈反應(qRT-PCR)法檢測miR-18a-5p的表達[8]
用Trizol試劑從培養的細胞中提取總RNA,根據說明書,使用第一鏈cDNA合成試劑盒(日本Takara)進行反轉錄以合成第一鏈cDNA。通過實時Qprusing SYBR預混料Ex-Taq試劑盒(日本Takara)檢測基因表達。從MicroRNA RT-qPCR試劑盒中得知miR-18a-5p和U6引物,以GAPDH作為內參,用2-CT法計算相對表達量。miR-18a-5p引物序列為上游:5'-ACCGACCTTGAGGCATACTT-3',下游:5'-GC-1CTACAGCCTCCTAGTACA-3';GAPDH引物為上游:5'CGACCACTTTGTCAAGCTCA 3',下游:5'AGGGGTCTACATGGCAACTG 3'。反應條件:95℃進行預變性10 min,95℃進行變性20 s,60℃進行退火30 s,循環40次。每組分別設置5個復孔。
2.7 以蛋白質印跡(Western blot)法檢測抗線粒體融合蛋白2(MFN2)蛋白的表達[9]
取對數生長期VSMCs細胞以2×106個/瓶接種于培養皿中,培養至傳代時,使用預冷的PBS洗滌3次,向每組加入RIPA裂解液150μL,對細胞進行均勻吹打,放置于4℃搖床上進行裂解15 min,之后將細胞刮下,經超聲振蕩離心后提取總蛋白,用BCA蛋白測定試劑盒進行定量,對上樣緩沖液均勻混合后,取蛋白40μg進行上樣后,經5%濃縮膠和10%的分離膠進行SDS-PAGE電泳(1.5 h,250 m A),于室溫下封閉1 h。加入一抗抗體(1∶2 000),經TBST沖洗3次后,加入HRP標記的羊抗兔IgG二抗(1∶5 000),室溫下孵育1.5 h,進行ECL顯影。用目的蛋白條帶和內參的比值表示目的蛋白水平。
3 統計學處理
用spss 22.0軟件進行統計分析。數據用表示,多組間比較用單因素方差分析,組間有差異使用LSD t檢驗進行兩兩比較。
結果
1黃芪對VSMCs增殖、存活和遷移的影響
與對照組比較,高糖組VSMCs細胞增殖能力、存活率和遷移能力顯著增加,差異有統計學意義(P<0.01);與高糖組相比,實驗組VSMCs增殖能力、存活率和遷移能力顯著降低,差異有統計學意義(P<0.05,P<0.01),見表1。
2黃芪對miR-18a-5p表達水平的影響
對照組,高糖組和實驗組miR-18a-5p的相對表達量分別為1.03±0.09,1.63±0.15和1.36±0.02。與對照組相比,高糖組中miR-18a-5p表達顯著升高,差異有統計學意義(P<0.01);與高糖組相比,實驗組miR-18a-5p表達顯著降低,差異有統計學意義(P<0.05)。
3 各組MFN2蛋白表達的比較
Western blot結果顯示,對照組,高糖組和實驗組MFN2蛋白相對表達水平為1.05±0.12,0.34±0.07和0.73±0.09。對照組和高糖組相比,高糖組和實驗組相比,差異有統計學意義(P<0.01和P<0.05)。此外,第1轉染組和第2轉染組中MFN2蛋白的表達量為0.69±0.08和0.43±0.06,差異有統計學意義(P<0.05)。結果見圖1。
討論
近來研究表明,糖尿病及其血管并發癥等疾病正威脅著人類的健康,因此改善此類疾病的發生及減輕疾病的癥狀對篩選和評價針對此類疾病的藥物有著非常重要的意義[10]。
血管平滑肌細胞在調節血管功能、維持體內穩態環境起著重要的作用,血管平滑肌細胞的增殖與遷移是糖尿病心血管并發癥如動脈粥樣硬化及術后再狹窄的關鍵因素之一[11]。高糖作為糖尿病和高糖血癥的獨立的最直接的病因,影響著血管平滑肌細胞的功能[12]。VSMCs是血管壁的主要組成部分,病理狀態下,VSMCs異常增殖可致動脈粥樣硬化,因此,抑制VSMCs增殖和遷移是心血管疾病治療的重點。
本研究顯示,黃芪可顯著降低高糖誘導的VSMCs增殖和遷移。進一步研究發現,黃芪可降低VSMCs中miR-18a-5p的表達從而上調MFN2的表達。
參考文獻
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專題1、實驗動物比較、相關標準研究領域
研究目標:對常用嚙齒類實驗動物進行比較研究并建立數據庫;制定填補國內空白的若干實驗動物地方標準;凡涉及本專題項目需將有關研究成果納入*實驗動物資源中心統一管理。
研究內容:
1、對常用大、小鼠、豚鼠和地鼠進行比較生物學和比較醫學系統研究,提出各自在生物醫學等主要研究領域應用和回避的依據、選擇原則、運用方法;
2、對常用實驗動物組織器官超微形態學結構進行比較研究并建立數據庫;
3、建立兔、犬、猴心血管和心電圖數據庫并進行分析評價;
4、制定實驗用羊標準、嚙齒類實驗動物墊料標準,大、小鼠運輸標準(鼓勵多家單位聯合申報)。
進度要求:年9月30日前完成
專題2、實驗動物新技術的建立及應用研究
研究目標:建立若干種實驗動物質量檢測、遺傳工程和保種育種新技術;建立斑馬魚主要臟器三維電子圖像。
研究內容:
1、從病原學、血清學以及分子生物學領域研究實驗動物中支原體、泰澤氏菌、螺桿菌、CAR桿菌的特性,確立先進、可靠的檢測方法;
2、以DNA和RNA各一種病毒的主要抗原基因進行真核表達,結合單克隆抗體技術建立診斷技術平臺,提升實驗動物質量控制水平;
3、選擇4-6個品系作為供體和受體,構建2-5個染色體替換的小鼠新品系,初步建立PCR-LDR小鼠基因分型技術平臺;
4、建立新的小鼠內源基因修飾技術,實現對小鼠內源基因的即時可逆調節,提高小鼠遺傳操作的效率,完善小鼠遺傳操作生物技術平臺的建設;
5、在組織學研究的基礎上,采用IT技術初步建立斑馬魚的某種三維電子臟器;
6、建立大鼠體外授精技術、冷凍技術、輔助體外受精技術(人工授精、ICSI);
7、建立2-4種實驗動物人工哺乳和無菌技術,并培育2-4種無菌動物。
進度要求:年9月30日前完成
專題3、動物模型及其效果評價體系的建立與應用研究
研究目標:建立若干種人類重要疾病的動物模型,并要求對每一種模型建立效果評價體系;凡涉及本專題項目需將有關研究成果納入*實驗動物資源中心統一管理。
研究內容:
1、建立若干種人類重要疾病的動物模型,重點建立不育大鼠模型、大、小鼠腦卒中模型、前列腺疾病模型、小型豬腹壁拉鏈模型、原位大腸癌模型等,并要求對以上模型建立效果評價體系;
2、建立和完善腫瘤高轉移動物模型篩選技術。
進度要求:年9月30日前完成
二、申請方式
1)本指南公開。凡符合課題制要求、有意承擔研究任務的法人、自然人均可以從“*科技”網站上進入“在線受理科研計劃項目課題可行性方案”,并下載相關表格《*市科學技術委員會科研計劃項目課題可行性方案(*版)》,按照要求認真填寫。書面可行性報告要求同時附上相應的知識產權狀況查新報告。鼓勵多家單位聯合申報,實行資源共享,并在申請材料中明確各自承擔的工作和職責,并附上合作協議或合同。
2)課題責任人年齡不限。鼓勵通過課題培養優秀的中青年學術骨干。作為課題責任人和主要科研人員,不得同期參與承擔的863、973、國家科技攻關和*市重大、重點科研課題數超過三項。
3)每一課題的申請人可以提出不超過2名的擬回避自己課題評審的同行專家名單(名單可以隨課題可行性方案一同提交)。
4)本專項課題的申請起始日年7月4日,截止日期為年7月25日。課題申報時需提交書面可行性方案一式8份,并通過“*科技”網站提交可行性方案和所有表格。書面可行性方案集中受理時間為*年7月21日至7月25日,每個工作日上午9:00—下午4:30。所有書面文件請采用A4紙雙面印刷,普通紙質材料作為封面,不采用膠圈、文件夾等帶有突出棱邊的裝訂方式。
5)網上填報備注:
1)登陸“*科技”網,進入網上辦事專欄;
2)點擊《科研計劃項目課題可行性方案》受理并進入申報頁面:
-【初次填寫】轉入申報指南頁面,點擊"專題名稱"中相應的指南專題后開始申報項目(需要設置“項目名稱”、“依托單位”、“登錄密碼”);