可誘導性表達呼吸道合胞病毒蛋白細胞系的快速構建方法研究
韓連連; 鐘輝; 郭麗 北京協和醫學院&中國醫學科學院病原生物學研究所; 北京100730
關鍵詞：呼吸道合胞病毒 piggybac轉座子 誘導性表達 細胞系構建
摘要：目的研發用以快速構建多種可誘導性表達呼吸道合胞病毒（RSV）蛋白的細胞系創新性的技術路線。方法將不同的RSV病毒蛋白基因分別連接到含有PiggyBac轉座子位點的Cumate誘導表達載體上，與PiggyBac轉座酶質粒共轉染HEK293細胞，利用嘌呤霉素進行篩選，并用Cumate誘導病毒蛋白表達。結果流式細胞儀及Westernblot檢測結果均表明，加入誘導劑Cumate后，篩選的細胞系中開始表達相應的病毒蛋白，提示細胞系構建成功。結論利用PiggyBac轉座子可以高效率的構建誘導性表達RSV病毒蛋白的細胞系。
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