中國水仙NtCCHC鋅指蛋白基因的克隆與原核表達
鄒暉; 李海明; 王偉英; 林江波 福建省農業科學院亞熱帶農業研究所; 福建漳州363005
關鍵詞：中國水仙 鋅指蛋白 基因克隆 蛋白表達
摘要：【目的】利用建立的多效唑誘導中國水仙的SSH文庫,克隆中國水仙NtCCHC鋅指基因的cDNA序列,進行原核表達,為深入研究NtCCHC鋅指基因在中國水仙中的功能奠定基礎。【方法】采用Trizol法提取多效唑處理后的中國水仙葉片總RNA,反轉錄成cDNA后,根據已知的CCHC鋅指蛋白基因序列設計引物進行基因克隆和同源性分析,并構建原核表達載體進行誘導表達?！窘Y果】克隆一段810bp的cDNA編碼區序列,編碼269個氨基酸,同源性分析表明與多個物種的CCHC基因存在著較高的同源性,命名為NtCCHC。該基因能成功在p GEX-4T-3原核表達載體上實現誘導表達,系統進化樹分析表明:NtCCHC與中國蓮遺傳距離最近?！窘Y論】克隆了中國水仙NtCCHC基因序列,并成功誘導表達。
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